罗氏realtime PCR操作指南(Roche LightCycler480)

LightCycler® 480 系统快速操作指南

一.配制好反应体系,封好膜。接通LC480与电脑电源,电脑帐号operator,密码LC480,点击LC480软件

二.开始实验:点击

击窗口右下角的开始实验。

三.编辑子集:点击

的孔,最后点击subset editor,点击左下角的,按ctrl键的同时鼠标选择本次实验,登录帐号user,密码Master1。 ,在列表中选择对应的程序,如H1N1或HBV,点,输入实验文件名点击窗口右下角的,点击软件界面右下角的应用。注意,一次实验可以同时运行相同扩增参数的多个实验(如H1N1、HIV与HCV),那么可以分别设置多个子集

设置样品:先在subset中选择本次实验的子集,点击左上角的,样品输入样品名,再选择标准品类型和浓度或者阳性对照/阴性对照

四.数据分析:

实验运行完成后进入,选择Abs Quant/Fit Ppoint,在窗

口中的Subset(第二行)中选择本次实验的子集,点击软

件界面中上方的,在Noise Band中调节noise

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band高度,使之处于对数增长期并高于所有噪音信号,如

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右图。

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再点击进入,点击软件界面中间偏右的

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鼠标点击软件右上角的为本次分析命名,如输入H1N1或其它名称

五.报告输出打印:点击软件右侧的保存当前实验的分析结果,再点击软件左侧的,点击软件中部左侧的detailed 选择需要输出的分析结果,如 H1N1, 分析中建议选择results或standard curve,点击软件界面左

下方的,生成PDF报告,如装了打印机,直接

,或者点击,选择pdf文件点击软件中间上方的

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