微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性

介绍了生物絮凝剂在废水处理方面的一些应用,及未来微生物絮凝剂发展的方向及前景。

第5第9卷期

21年9 00月

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性

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利用生物技术,从微生物或其分泌物中提取、纯化而获得的一种安全、高效、可生物降解且不污染环境的新型水处理剂,包括糖蛋白、多糖、纤维素、白质和 D A蛋 N

养 2,备用。以高岭土悬浊液为模拟废水,用肉眼观 4 h

察各个菌种发酵液对高岭土悬浊液的絮凝活性进行初 筛,对初筛后获得的菌种,采用上述相同的方法平行发酵培养,通过测定各个菌种发酵液的絮凝活性进行复筛,进而得到絮凝潘陛最优的菌种。 1絮凝活性的测定 . 3

等。此外 MB J F还具有种类多、微生物生长陕和易于 扩大培养等优点,因此微生物絮凝剂具有广阔的应用前景,它的研究正成为当今世界絮凝剂方面研究的重要 课题。 自从 1 3 9 5年美国科学家 B t red从活性污泥中 ut f l ei

在 10 0 mL的量筒中加入 7 0 mL左右的蒸馏水, 0 高岭土, mL

1 C C2 .g 4 5% a 1 溶液,加蒸馏水至 10。 0 mL 倒入 10 5 mL的烧杯中, p调 H值至 7左右再加 5 . 5 mL

筛选出微生物絮凝剂产生菌以来,各国的研究者在这个领域取得越来越多的成果,筛选出了大量高效的产微生物絮凝剂的菌种。目前,国内外学者们分离、筛选出的产微生物絮凝剂的菌株有几十种,对 MB F的组成、 絮凝特性、絮凝机理及应用做了大量研究工作【证明 5叫 MB F对多种废水、污泥的絮凝效果显著。自 2世纪 7 0 0年代以来,国外对于微生物絮凝剂的应用部分已经工业 化,而我国对于微生物絮凝剂的研制和应用还处于实

的发酵液,然后放在磁力搅拌器上搅拌 4 n静置 , mi 6 mi,吸取上清液,用紫外可见光分光光度计 n ( AC R 0 0在 5 0n处测定吸光度 ) H H D 5 0 ) 5 m,以不加发酵掖的吸光度 o为对照,照下列公式可计算 )按 出絮凝率叩】“:【 J Ao A - —

, F

×1 0 0%

验室阶段。笔者采取传统的方法拟从活性污泥中分

1菌种不同生长阶段的絮凝活性及其分布 . 4在 5 0m 0 L的锥形瓶中装入 2 0mL液体培养基高 0 压灭菌,接种后放在 3℃的恒温震荡培养器中培养, 0

离、筛选出产 MB F的菌株,并对其絮凝特性及应用前 景进行初步探讨。

l材料与方法 1取样点及细菌培养条件 . 1

每隔一段时间取样 1,次以蒸馏水为空白对照测定菌生长量,用 o溶液在 60 nl 6 o( 0 l波长处的吸光值,单位 t为1 )表示,得出生长曲线【后,在微生物生长的各个 J阶段取样,测定其各个生长阶段的絮凝率。

分离细菌所用的活性污泥取自西安市第三污水处 理厂。

将发酵液以 1 0/ i 00 mn的速度离心 1 i,吸取 0r 0 n m 上清液后,将菌种用生理盐水洗涤 l2, ̄次再将菌种配制成与上清液同体积的菌悬液,分别检测发酵液、上清 液、菌悬液以及无菌培养基的絮凝活性。

实验中所用的培养基分别是:牛肉膏蛋白胨培

养基 (白陈 1. g蛋 0,牛肉膏 30,N C .g 0 . g a 1 0,琼 5 脂 1- 0g 5 2,蒸馏水 1 0,调节 p . 72; 0 0 mL H 70 .) -查氏培养基 (糖 3 .g KC . g K HP 4 .g

蔗 00, I 5, 2 O 0, O 1 Mg SO4‘7 0 5g, Na O 3 . H2 0. N 3 0g, F SO40. e 01g

2结果与分析 21絮凝剂产生菌的分离与筛选 . 用牛肉膏蛋白胨培养基共分离出来 1 0株菌种,分 别编号为:N l D 2 D—,N一,…,N -0 D 1;查氏培养基共

水 1 0,调节 p 0 0 mL H为 70;葡萄糖培养基 ( .)葡萄 糖 2. g 0 ,尿素 0 ,酵母膏 2 ,K 2O . g 0 .g 5 . g H P 42 , 0 0 K H O 0,N C 01, H ) O 0 g, 10 mL 2 P 4 .g a 1.g ( 4S 4 .水 00, 5 N 2 2调节 p为 7 - .) H .8。 5 0

分离出 9株菌种,分别编号为:C 1 c 2一, .,…,C9 -;葡萄糖培养基共分离出 1株菌种,分别编号为:P1 2一, P2 -,…,P 1。初筛时用肉眼观察到共有 6种菌株具一 2

细菌培养条件为:温度均控制在 3 0℃,液体培养基在 10 0/ i 5M8 rn的恒温震荡培养箱中震荡培养 2, r a 4 h固体培养基在恒温培养箱中倒置培养 2。 4 h 1菌种分离和筛选 . 2

有絮凝作用,分别是 N 2 N一, D一, D-,一, D一, D 3 N 6 N 7 C 2 P4 -。比较这 6种菌种昕产絮体的大小、絮体的沉降速度以及上清液的浑浊程度如表 1。 从表 1的比较中,得到絮凝效果较好的有 3种菌株, 即: D 2 D一,N 6 N一,N 3 D一。这 3种菌株所产絮凝剂形成 的絮体较大且絮体的沉降速度也较陕, i的静置后, 6 n m

将从污水厂取回来的活性污泥放在磁力搅拌器上

搅拌 5 n用滤纸过滤, mi,取滤液, 3 1取份 mL所得滤 液经过梯度稀释后分别转接到上述 3种培养基的液体培

养基中,在 3 0℃的叵温培养箱中倒置培养 2。将平 4h板中得到的单菌落编号后划斜面保存。

都能得到较清的上清液。进一步测定这 3种菌株的絮凝率,如表 2中所示。

将各斜面中的的纯菌种分别接种到相应的掖体培 养基中,在 10 10r n 0℃的条件下连续震荡培 5 ̄ 8 mi,3/

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