免疫学必备

与—COO¯之间都将出现低离子区，同时也出现高电势，高电势迫使Pro¯向Cl¯迁移，—COO¯向Pro¯迁移。如：一个Cl¯领路，—COO¯推动，蛋白在中间，这样就起到浓缩的作用了。在浓缩胶运动中，由于胶联度小，孔径大，Pro¯受阻小，因此不同的蛋白质就浓缩到分离胶之上成层，起浓缩效应，使全部蛋白质处于同一起跑线上。当蛋白质进入分离胶时，此时Pro¯，Cl¯，甘aa离子在PH8.8的溶液中，Cl¯完全电离而很快到达正极，甘aa电离度加大很快跃过蛋白质，而到达正极，只有蛋白质分子在分离胶中较为缓慢的移动。由于Pro¯在电泳过程中，受到溶液离子的变化而PH值发生变化，但每一瞬间，其所带电荷数除以单位质量是不同的，所以带负电荷多者迁移快，反之则慢，这就现了电荷效应。由于胶孔径小，而且成为一个整体的筛状结构，它们对大分子阻力大，小分子阻力小，起着分子筛效应，也就是蛋白质在分离胶中，以分子筛效应和电荷效应而出现迁移率的差异，最终达到彼此分开。 3、PAGE胶的聚合原理：甲叉双丙烯酰胺和丙烯酰胺在过硫酸胺的作用下聚合，形成胶，如下图：

CH2=CH —CH2—CH—[CH2—CH]x—

︳ ︳ ︳

C=O CH2 CO C=O ︳ ∣ ︳ ︳ NH CH NH NH2

︳ ︱ ︳

CH2 ＋ C=O CH2 ︳ ︳ ︳ NH NH2 NH ︳ ︳

C=O CO

︳ ︳

CH2=CH —CH2—CH—[CH2—CH]x— ︳ C=O ︳ NH2 (甲叉双丙烯酰胺) (丙烯酰胺) ( 网状聚合物)

催化剂：过硫酸铵（AP）在隔氧的状态下，最好现配现用，使用新鲜的。

加速催化剂：TEMED，四甲基乙二胺。催化剂的作用是使单体聚合成网状聚合物。 4、SDS聚丙烯酰胺凝胶的分离范围

丙烯酰胺浓度（％）

15 12 10

线性分离范围（KD）

10～ 43 12～ 60 20～ 80