2CH-1R株全基因组序列测定及遗传变异分析[1]
第32卷第7期2010年7月
中国预防兽医学报
ChineseJournalofPreventiveVeterinary
V01.32.No.7Jul.2010
Medicine
猪繁殖与呼吸综合征病毒CH一1R株全基因组序列
测定及遗传变异分析
石文达,刘永刚,王洪峰,王淑杰,马
平,徐敏,武佳斌,蔡雪辉’
(00匡1农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001)
摘要:为了解猪繁殖与呼吸综合征的弱毒(PRRSV)株在基因组水平上的变异和分子遗传特征,本研究对致弱毒株CH.1R株进行了全基因组序列的测定。结果表明,CH一1R株基因组序列全长15
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nt,具有典型的动脉
炎病毒基因组结构。通过与亲本株CH.1a株序列进行比对,发现其基因组内碱基的缺失和突变主要分布在ORFIa基因的第219l位~2193位、ORF5基因的第439位、ORF6基因的第49位和ORF7基因的第28位和第139位。其中PRRSVCH.IR株的Nsp2蛋白和结构蛋白的变异相对较大,尤其是Nsp2蛋白的变异,同CH.1a株相比,CH.1R株的Nsp2蛋白存在多处核苷酸的突变,其中包括连续3个核苷酸发生缺失;由结构蛋白基因推导的氨基酸序列共有17处变异,在各结构蛋白中以GP3和GP5蛋白变异较大,而高度保守的M蛋白和N蛋白,
同样发生了变异,由此预测了Nsp2蛋白的妒1E、GP5蛋白的L146Q、M蛋白的Q16L和N蛋白的K46N处毒力相关
的氨基酸位点,推测其在毒株致弱过程中起到了重要的作用。
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;全基因组序列分析
中图分类号:¥852.61
文献标识码:A
文章编号:1008.0589(2010)07—0512.05
Sequencinganalysisoffulllengthgenomeofporcinereproductive
andrespiratorysyndromevirusCH一1Rstrain
SHI
Wen—da,LIUYong-gang,WANGHong—feng,WANGShu-jie,MA
WUJia-bin.CAIXue—hui‘
Ping,XUMin,
(DivisionofSwineInfectiousDiseases,StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotcchology,HarbinVeterinaryResearchInstituteof
ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Harbin
150001,China)
Abstract:TostudythegeneticvariationandmolecularfeaturesofthePRRSVattenuatedstrain,thefulllength
attenuatedPRRSVCH-IRstrainwassequenced.Thecompletegenomewas15425CH-la,severalnucleotidedeletions
nt
genomeof
in
len垂h.Comparedwitlltheparentstrain
at
and
mutationsintheCH IRstrainwere
identified,mostlylocatedposition2191
to
2193of
ORFla,103ofORF5,49ofORF6,28and139ofORF7.ThevariationsintheNsp2proteinandstructuralproteinregionwere
significant,with
17
numerousnucleotidemutationsandthreenucleotidedeletionswerefoundintheCH一1RNSP2
at
protein.There
were
aminoacidsvariationsidentifiedinthestructuralprotein,especiallyGP3andGP5proteins.Mutation
highlyconservative
M
protein
and
Nproteinalsooccurred.Based
on
thesequenceanalysis,fourofvinls
of
virulentrelatedaminoacidsiteswerepredicted,
includingE捌ofNsp2process.
protein,Q…ofGP5protein,L。6
MproteinandN”ofNprotein,whichwasimportantintheattenuated
Keywords:PRRSV;full*Correspondingauthor
lengthgenome;sequencing;analysis
收稿日期:2009.09.20
基金项目:十一五国家支撑计划(2006BAD06A07)
作者简介:石文达(1981.),男,黑龙江双鸭山人,实习研究员,硕士,主要从事动物病毒与分子免疫学研究‘通信作者:E-mail:acil39@sina.corn
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