第32卷 第2期2012年2月

中 南 林 业 科 技 大 学 学 报

Journal of Central South University of Forestry & TechnologyVol. 32 No. 2

Feb. 2012

八角属植物AFLP体系的建立与优化

潘晓芳，孙雪阳，黄寿先，周传明，陈翠湖，闭冬玲

(广西大学 林学院，广西 南宁 530004)

摘 要： 以八角属部分树种和八角品种共56个样品为试验材料，利用AFLP分子标记技术进行遗传多样性分析。采用改良的CTAB法提取总DNA，通过对酶切-连接反应、预扩增和选择性扩增反应过程中的关键因素进行优化，建立了适合八角属植物的AFLP分子标记体系。该体系应用于八角AFLP研究，能够得到高质量的总DNA和清晰的遗传标记图谱，研究结果为八角种质资源分子生物学研究提供技术支撑。关键词： 八角属；分子标记；AFLP；反应体系

中图分类号：S794 文献标志码：A 文章编号：1673-923X(2012)02-0086-03

Establishment and optimization of AFLP technical system for Illicium

PAN Xiao-fang, SUN Xue-yang, HUANG Shou-xian, ZHOU Chuan-ming, CHEN Cui-hu, BI Dong-ling( Forestry College, Guangxi University, Nanning 530004, Guangxi，China )

Abstract: By taking 56 samples of Illicium species and Illicium verum Hook. f. varieties as testing materials, and using AFLP molecular markers technology, the species and varieties’ genetic diversity were analyzed. The total DNA of the species and varieties were extracted adopting the improved CTAB, and the AFLP molecular markers system that is suitable for Illicium plants was established. Through applying the system to study Illicium plants, high quality total DNA and clear genetic markers map were obtained. The results provide technical support for studying molecular biology of Anise germplasm resources.Key words: Illicium; molecular marker; AFLP; reaction system

八角科Illiciaceae为一单属科，仅八角属Illicium［1］，全世界有34种，呈东亚—北美间断分布，主产我国西南部至东部，我国有25种［2］。八角Illicium verum Hook. f.［1］为八角科八角属重要的香料和药用植物，我国八角栽培面积和产量均占世界的85 %，主要分布在广西、云南、广东等省区［3］。采用分子标记技术对八角属植物开展遗传多样性和亲缘关系研究，对八角属植物分类和八角育种有着重要意义。

AFLP(amplified fragment length polymorphism)，即扩增片段长度多态性，是荷兰Keygene公司Zabeau等(1992)、Zabeau和Vos等

(1993)发展的一种新的DNA指纹技术[4-5]。其原理简单，引物设计巧妙，结合了RFLP和RAPD技术的特点，被人们普遍认为是构建遗传图谱较好的分子标记，对于植物遗传多样性的鉴定、物种亲缘关系的研究作用突出[5]。本研究应用AFLP分子标记技术对八角属植物进行遗传多样性鉴定，通过建立和优化八角AFLP体系，为八角种质资源分子生物学研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

八角试验样品分别来自广西国有派阳山林场

收稿日期：2011-09-12

基金项目：广西科学基金项目“八角种质资源的分子鉴别及遗传特性分析(桂科基0639008)”作者简介：潘晓芳(1963—)，男，壮族，广西武鸣人，副教授，博士研究生，硕士生导师，主要从事经济林栽培与良种选育教学与研究；E-mail：gxpxf9460@sina.com