Her2/c-erbB-2基因(其产物为膜蛋白p185)是表皮生长因子受体(EGFR)基因家族的一员,在约30%的乳腺癌中发现了其过量表达。为了鉴定抗p185单克隆抗体的抗原表位并进一步研究它们的相互作用,采用PCR的方法从含Her2/c_erbB_2基因的pBabe/erbB_2质粒中扩增了p185胞外区的富含

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富含二硫键的膜蛋白!"#$胞外区在大肠杆菌中的可溶性表达和性质鉴定

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李良维，刘海波，胡思怡，梁顿，程联胜"，刘兢

RSR2=EDLT02，RSUK=2LV(，KUG2LW2，RS9+X5-E，IKP+XR2=ELG@0ED"=E4RSU,2ED

中国科学技术大学生命科学学院细胞免疫学实验室，合肥

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摘要（其产物为膜蛋白:"J%）是表皮生长因子受体（PXH/）基因家族的一员，在约>$Z的乳腺癌中发现K08!Y1L087VL!基因

了其过量表达。为了鉴定抗:"J%单克隆抗体的抗原表位并进一步研究它们的相互作用，采用MI/的方法从含K08!Y1L087VL!基因的:V=70Y087VL!质粒中扩增了:"J%胞外区的富含二硫键的第一、二结构域和第四个结构域。产物克隆到:XP[Y#?L"载体后，转化大肠杆菌\82D=62V（5P>）用低浓度SM?X进行低温过夜诱导后将菌体压力破碎，:R.AG菌株，G5GLM9XP检测表达上清，得到了可溶性表达的融合有XG?的目的蛋白。经PRSG9、可溶性表达产物具有完全的抗体结合活性，T0A;08E7)(;等方法鉴定，且当用凝血酶把XG?切掉后该活性仍然保留。:"J%胞外区融合蛋白的成功表达将为二硫键富含类蛋白的表达提供参考；并为将来具有肿瘤细胞生长抑制活性的抗:"J%单克隆抗体的抗原表位鉴定，以及为PXH/家族受体的结构和功能关系的研究打下基础。关键词

:"J%胞外区，融合蛋白，谷胱甘肽G转移酶

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文献标识码

9

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中图分类号

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国家高技术研究与发展计划项目（+(*!$$"99!"%>J"），国家自然科学基金资助（+(*>$#$$$&J）和高等学校博士学科点专项科研基金资助。（+(*!$$!$>%J$#J）