４４

实验研究

浅刺针法对脑梗塞大鼠脑组织缺血半暗带Ｆａｓ、Ｂ眦一２蛋白表达的影响＊

范郁山，黄婕，谭小华，王‘琼

（广西中医学院，广西南宁５３０００１）

摘要：目的：研究浅刺针法对脑梗塞后大鼠脑组织缺血半暗带细胞Ｒ瞄、Ｂｃｌ一２的影响。方法：将６０只ＳＤ大鼠随机分为浅刺针法组（Ｉ组）、常规针刺组（Ⅱ组）、模型对照组（Ⅲ组）、正常对照组（Ⅳ组）。每组再随机分为术后２、７、１４天３个时间点，每个时间点各５只大鼠。从神经体征评分、采用免疫组化法测定脑组织Ｆ鹪、Ｂｃｌ一２蛋白表达的变化方面，观察经过２、７、１４天治疗后的Ｉ、Ⅱ组大鼠和相应时问未经治疗的Ⅲ、Ⅳ组大鼠大脑神经细胞凋亡情况。结果：３个时问点的浅刺针法组大鼠脑组织缺血半暗带的Ｆ鹳蛋白表达明显低于模型组和常规针刺组，而Ｂｃｌ一２则明显高于模型组和常规针刺组（Ｐ＜０．０１），说明浅刺针法可有效改善脑梗塞大鼠的神经缺损体征。结论：Ｆ够、Ｂｄ一２对脑梗塞大鼠脑组织缺血细胞调亡有重要作用，浅刺针法通过下调Ｆ鹳蛋白表达扣上调Ｂｄ一２蛋白的表达，抑制细胞凋亡，发挥神经保护作用。并在分子水平证实经络在体表有其物质基础，浅刺可取得有效的刺激作用，使浅部组织的经络特异性能充分显示出来。

关键词：浅刺针法；脑梗塞；‰、Ｂｃｌ一２蛋白表达

中图分类号：Ｒ２４５．３

文献标识码：Ａ

文章编号：１０Ｑ５一ｃｒ７７９（２００８）０８—００４４—０４

１．２实验动物选择及分组

选用广西药品检验所实验动物中心提供的健康ＳＤ大鼠６０只，清洁级，体重２５０

ｇ，雌雄各半，随

机分为４组，即Ｉ组浅刺针法组，Ｈ组常规针刺组，ＩⅡ组模型对照组，Ⅳ组正常对照组。每组再随机分为术

ｇ±３０

脑血管病是严重威胁人类健康的常见病，是目前危害人类健康的三大疾病之一，我国每年死于心脑血管疾病的患者占死亡总数的第一位【¨。除成人卒中急性期溶栓治疗外，其他治疗脑梗死的药物均未取得满意的临床疗效。因此对本病的治疗仍是国内外研究的热点。针灸是脑梗塞的有效疗法之一。笔者在总结前人及多年研究的基础上，运用浅刺针法治疗脑梗塞疾病取得了较好的临床疗效［２｜。认为经络在肌体浅层有其物质基础，浅刺亦能有效地刺激经络和穴位，应该重视经络学说中的皮部、络脉理论的应用研究，以提高针灸治疗效果。

本研究拟运用免疫组织化学方法，从浅刺针法对大脑中动脉栓塞（ＭＣＡｏ）模型大鼠脑组织缺血半暗带神经细胞凋亡情况的影响，以Ｆ鹅、Ｂｃｌ一２蛋白表达变化为观察指标，探讨浅刺针法治疗脑梗塞疾病的可能作用机制。

ｌ材料与方法１．１主要试剂与器材

后２、７、１４天３个时间点，每个时间点各５只大鼠。１．３模型制作方法

参考谭盛［３］的血栓栓塞法加以改良制备大鼠大脑中动脉栓塞（ＭＱ旧）模型。在无菌条件下自大鼠尾部取血约２Ｉｌ】ｌ，放置２４ｈ后把无菌自然干燥同体或异体血凝块研碎筛滤，用等量盐水制成栓子混悬液，使其能刚好通过６号头皮针为宜。将大鼠仰卧固定，用３％戊巴比妥钠（３６ｒ形ｌ【ｇ）腹腔内注射麻醉后，作颈部正中切口，分离左侧颈总、颈内、外动脉。然后将头皮针从颈外动脉穿至与颈内动脉相交处，先用动脉夹，夹闭该侧颈总动脉，从颈外动脉注入栓子混悬液０．４ＩＩｌｌ并迅速打开颈总动脉夹，血流将栓子从颈内动脉冲至远端的动脉，退出针头并结扎该侧颈外动脉，逐层缝合颈部肌肉、皮肤。动物造模苏醒后表现为：①左侧Ｈ０ｍｅｒ征，②提尾时右侧前肢内收屈曲，具有以上两项体征者选用。根据ＢｅＩｄｓ∞评分分级法加以改进，分别观察其神经和行为学变化。满分１２分，分数越高，则损伤越重。无神经病理症状或者神经病理症状不明显的予以剔除。

１．４处理方法

Ｉ组（浅刺针法组）：穴位定位：根据２００３年中国中

Ｆ鹄、Ｂｃｌ一２单克隆抗体试剂盒，德国美康删３５５ｓ型全自动切片机；ＯＩ删ＰｕｓＰＭ一１０型显微摄影仪；北

航图像分析系统；华佗牌不锈钢毫针；上海医用电子仪器厂生产Ｇ６８０５一Ｉ型电针治疗仪等。

＊基金项目：广西科技厅科技攻关课题，桂科攻舛７２００２—２３。作者简介：范郁山（１９６７一），男，教授，从事专业：中医针灸学。