·１９６·中国药理学与毒理学杂志２０１３年１１月第２７卷增刊１　ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ，Ｖｏｌ２７，Ｓｕｐｐｌ１，Ｎｏｖ２０１３和ＦａｓＬ阳性蛋白表达给药组较对照组明显增加，差异显著，肾脏损伤分子（ＫＩＭ１）的表达给药组较对照组也是明显增加，且差异显著。结论　大鼠能够获得稳定的氯胺酮自身给药行为，氯胺酮自身给药引起大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白表达的增加和肾脏组织的病变，说明滥用氯胺酮对大鼠的心脏和肾有损伤。

通讯作者：刘　昱

Ｔ７．２６　２，５己二酮诱导ＰＣ１２细胞凋亡及其毒作用机制

刘　爽，郑小美，朴丰源，王哲敏，陈若霖，董　伟，戚　媛，李双月

１６０４４）（大连医科大学劳动卫生与环境卫生教研室，辽宁大连１

　　摘要：目的　观察２，５己二酮（２，５ＨＤ）暴露对ＰＣ１２细胞凋亡的影响和探讨其毒作用机制。方法　

－１将大鼠ＰＣ１２细胞体外暴露于２，５ＨＤ１０，２０和４０ｍｍｏｌ·Ｌ，暴露时间为１２，２４和３６ｈ。用Ｈｏｅｃｈｓｔ

用流式细胞仪（ＦＩＴＣＡｎｎｅｘｉｎＰＩ双染）对染毒后的凋亡百分３３３４２荧光染色观察染毒后细胞核的变化；Ⅴ／

率进行定量分析；用透射电子显微镜观察凋亡细胞的超微结构；用ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ检测Ｂｃｌ２、Ｂａｘ和胱天蛋

ＮＡ表达；用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析Ｂｃｌ２、Ｂａｘ和胱天蛋白酶３的蛋白表达。结果　①Ｈｏｅｃｈｓｔ白酶３的ｍＲ

３３３４２荧光染色观察：对照组细胞呈现均一亮度的蓝色荧光；而各２，５ＨＤ暴露组出现个别ＰＣ１２细胞荧光亮度较强，细胞核高度皱缩，甚至分叶的现象。②流式细胞仪检测凋亡百分率：２，５ＨＤ暴露３６ｈ后，与对

－１照组（５．８４％）相比，２，５ＨＤ１０，２０和４０ｍｍｏｌ·Ｌ染毒组凋亡百分率分别为９．８９％，１０．１５％和

－１１６．４２％，显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）；在２，５ＨＤ４０ｍｍｏ·ｌＬ染毒组，与１２ｈ（９．４９％）染毒时间相比，２４

和３６ｈ２，５ＨＤ染毒的ＰＣ１２细胞凋亡百分率（１０．３６％和１６．４２％）显著增高（Ｐ＜０．０５）。③透射电镜观察：透射电镜观察发现，２，５ＨＤ暴露ＰＣ１２细胞出现胞体皱缩、胞浆空泡变性、染色质边缘化及细胞器解体等现象，细胞损伤程度与２，５ＨＤ浓度和暴露时间呈正相关。④ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ分析：ＰＣ１２细胞暴露２，５ＨＤ３６ｈ后，与对照组相比，Ｂｃｌ２的ｍＲＮＡ表达随着２，５ＨＤ浓度增高而显著降低（Ｐ＜０．０５），呈现剂量依赖关系；Ｂａｘ的ｍＲＮＡ表达随着２，５ＨＤ浓度增高而显著增高（Ｐ＜０．０５），呈现剂量依赖关系；２，５ＨＤ２０

－１和４０ｍｍｏ·ｌＬ组ＰＣ１２细胞中胱天蛋白酶３的ｍＲＮＡ表达显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。⑤Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ

－１分析：２，５ＨＤ暴露３６ｈ后，２０和４０ｍｍｏ·ｌＬ组Ｂｃｌ２的蛋白表达显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），而Ｂａｘ和

－１Ｐ＜０．０５），并呈现剂量依赖关系。在２，５ＨＤ４０ｍｍｏｌ·Ｌ组，胱天蛋白酶３的蛋白表达显著高于对照组（

与１２ｈ暴露相比，２４和３６ｈ暴露的ＰＣ１２细胞Ｂｃｌ２的蛋白表达显著降低（Ｐ＜０．０５），而Ｂａｘ和胱天蛋白酶３的蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０５）。结论　２，５己二酮可引起大鼠ＰＣ１２细胞凋亡；其机制可能是通过抑制Ｂｃｌ２／Ｂａｘ的信号通路而发挥毒作用。

基金项目：国家自然科学基金项目（８１２７３０３８）

通讯作者：朴丰源，Ｅｍａｉｌ：ｐｉａｏ＿ｆｙ＿ｄｙ＠１６３．ｃｏｍ

Ｔ７．２７　长期铅暴露致大鼠神经退行性改变

冯　昶，范广勤，黎砚书，陈　英，焦　欢，周繁坤，杜桂花，王志平，管临福

３００００）（南昌大学公共卫生学院，江西南昌３

　　摘要：目的　探讨长期铅暴露所致的大鼠中枢神经系统退行性改变及其相关基因蛋白表达的变化。方

－１Ｄ大鼠随机分为空白组、低铅组和高铅组，分别给予０，８００，１５００ｍｇ·Ｌ醋酸铅溶液饮法　将成年雌性Ｓ

水染毒，１０ｄ后与雄性大鼠合笼，繁殖仔鼠，雌鼠染铅至仔鼠断乳。雄性仔鼠断乳后对应于其母鼠所在组别

－１继续分别给予醋酸铅溶液０，３００，９００ｍｇ·Ｌ。仔鼠于断乳（３周）、中年（４１周）、老年（７０周）时，采用

ＩＣＰＡＥＳ测定血铅和皮质、海马铅含量；硫堇染色观察３个年龄皮质、海马神经元密度；采用透射电子显微