[文章编号]　1007-3949(2010)18-12-0935-04

·实验研究·

血管紧张素Ⅱ通过下调巨噬细胞C型1类尼曼-匹克蛋白的表达而减少细胞胆固醇流出

李慧,杨志明,肖传实,康玉明

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(1.山西医科大学第二医院心血管内科,山西省太原市030001;2.西安交通大学医学院生理学教研室,陕西省西安市710061)

[关键词]　血管紧张素Ⅱ;　C型1类尼曼-匹克蛋白;　巨噬细胞;　动脉粥样硬化

[摘　要]　目的　以THP-1源性巨噬细胞为研究对象,探讨血管紧张素Ⅱ对THP-1源性巨噬细胞C型1类尼曼-匹克蛋白表达及胆固醇流出的影响。方法　体外培养的人THP-1单核细胞经佛波酯诱导48h,使之分化为巨噬细胞,采用不同浓度的AngⅡ进行处理,逆转录聚合酶链反应和WesternBlotting蛋白印记技术分别检测血管紧张素Ⅱ对C型1类尼曼-匹克蛋白mRNA与蛋白表达的影响,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化。结果　与对照组相比,血管紧张素Ⅱ能下调THP-1源性巨噬细胞C型1类尼曼-匹克蛋白mRNA与蛋白质的表达,减少巨噬细胞内胆固醇流出(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论　血管紧张素Ⅱ可能通过抑制THP-1巨噬细胞C型1类尼曼-匹克蛋白的表达,减少巨噬细胞内胆固醇流出,进而促进动脉粥样硬化的发生发展。[中图分类号]　R363[文献标识码]　A

AngiotesinⅡInhibittheExpressionofNiemann-PickProteinC1inTHP-1Macropha-gesandDecreasetheEffluentRateofCholesterol

1112LIHui,YANGZhi-Ming,XIAOChuan-Shi,andKANGYu-Ming

(1.DepartmentofCardiology,TheSecondAffilliliatedHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan,Shanxi030001,China;2.Depart-mentofPhysiology,CollegeofMedicine,Xi'anJiaotongUniversityXi'an,Shan'xi710061,China)

[KEYWORDS]　AngiotesinⅡ;　Niemann-PickProteinC1;　THP-1Macrophages;　Atherosclerosis[ABSTRACT]　　Aim　ToinvestigatetheeffectofangiotesinⅡ(AngⅡ)ontheexpressionofniemann-pickproteinC1(NPC1)inTHP-1macrophages,andalsoexploretheeffectontherateofcholesteroleffluent.　　Methods　Macropha-geswereconvertedfromTHP-1monocytesinducedbyphorbol12-myristate13-acetate(PMA)for48h,andthentheyweretreatedbyAngⅡatdifferentconcentrations.　TheexpressionofNPC1mRNAandproteinwasdeterminedbyreversetran-scription-polymerasechainreaction(RT-PCR)andWesternBlottingrespectively.　Cholesteroleffluentwasmeasuredbyliquidscintillator.　　Results　Comparedwiththecontrolgroup,theexpressionofNPC1mRNAandproteinweresignifi-cantlydownregulatedwhenincubatedwithAngⅡdose-dependently.Meanwhile,theeffluentrateofcholesterolwasalsodecreased.　　Conclusion　AngiotesinⅡmayinhibittheexpressionofNPC1inTHP-1macrophagesanddecreasetheef-fluentrateofcholesterol,contributingtothedevelopmentofatherosclerosis.

　　C型1类尼曼-匹克蛋白(niemann-pickproteinC1,NPC1)是细胞晚期内体(lateendosome,LE)中含有一个固醇感受域的跨膜糖蛋白在每一种组织中都表达

[2]

[1]

AngⅡ)是肾素-血管紧张素-醛固酮系统中主要的活性肽产物,是一种加速动脉粥样硬化的重要危险因子,通过升高血压、内皮损害、炎症状态和促进平滑肌细胞增殖等作用促进动脉粥样硬化的发生发展

[5]

。NPC1几乎

,除小肠上皮细胞是促进

胆固醇吸收外,它主要识别蛋白质环境中的游离固醇,参与转运细胞内的胆固醇到细胞膜,进而导致胆固醇流出,促进细胞胆固醇逆向转运,防止动脉粥样硬化(As)的形成

[3,4]

。最近研究发现AngⅡ的一种新的致动脉粥样

[6,7]

硬化机制,即通过抑制巨噬细胞胆固醇的外流,

减少胆固醇逆向转运,从而加速动脉粥样硬化。本研究旨在研究AngⅡ对参与胆固醇逆向转运的关键因子NPC1的表达及胆固醇流出的影响。

。血管紧张素Ⅱ(angiotesinⅡ,

[收稿日期]　2010-09-27　　　　[修回日期]　2010-11-18[基金项目]　山西省科技攻关项目(20100311098-4)[作者简介]　李慧,硕士研究生,E-mail为lihui4821@sina.com。通讯作者杨志明,主任医师,主要从事冠心病的基础与临床方面的研究,E-mail为zhimingyang800@sina.com。肖传实,主任医师,教授,博士研究生导师,主要从事冠心病的基础与临床研究。

1　材料和方法

1.1　主要材料

人THP-1单核细胞购自中国科学院上海细胞