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组织培养中有效无菌材料获得的试验研究总第129期

组织培养中有效无菌材料获得的试验研究

张月娇

(福建省林业科技试验中心　漳州　363600)

Ξ

摘　要:在组织培养中,。本

文主要以桉树为代表,通过对桉树外植体的采集、,阐述了获得有效无菌材料的途径和方法。关键词:组织培养;无菌材料;Trial-bacteriaMaterialObtainedamongTissueCulture

ZhangYuejiao

(ForestryScientificandResearchTrialCenterinFujianProvince　Zhangzhou　363600)

Abstract:Effectivenon-bacteriamaterialobtainedamongtissuecultureisanimportantpre-conditionandbasicguaranteeforsuccessfultissuecultureinplant.ThispapermaintakesEucalyptusspp.asrepresentativethroughtestresearchonprocessofcollection,sterilizationandinoculationetc.inex-plantofEucalyptusspp.,elucidatespathwayandmethodonobtainedeffectivenon-bacteriamaterial.Keywords:tissueculture;non-bacteriamaterial;Eucalyptusspp.

　　植物组织培养是20世纪初,以植物生理学为

基础发展起来的一门新兴技术。1902年德国植物学家G.Haberlandt根据细胞理论,大胆提出了植物细胞全能性理论。从理论上讲,植物细胞都具有全能性,植物的每个细胞都有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力,这为植物组织培养技术奠定了坚实的理论基础。任何器官、任何组织都可以作为组织培养的外植体。但实际上,不同品种、同一品种不同部位之间存在很大差异,同时由于组织培养是建立在无菌操作基础之上的专门技术。因此,在进行植物组织培养时,必须选择合适的外植体并进行有效地灭菌和接种,才能确保组织

采集部位萌芽枝侧　枝

采集时间晴天午后

雨天午后晴天午后雨天午后

接种数

50505050

培养工作顺利进行。本文试图以桉树(Eucalyptusspp.)组织培养为代表,阐述获得组织培养中有效无菌材料的途径和方法,为进一步研究和组培生产提供技术借鉴。

1　外植体的采集

在植物组织培养过程中,如何选择合适的、最易表达全能性的材料,以及最佳的外植体采集时间是决定组培体系成功建立的前提。在进行桉树的组织培养中发现,以选择晴天午后的优树半木质化萌芽条为外植体,最易诱导成功,分化率最高(如表1)。

芽分化情况

表

1　桉树不同部位、不同时间采集的外植体诱导状况污染数污染率/%

0321138

4642276

5d后陆续开始萌发小芽,20d后有部分芽丛

7d后开始萌发小芽,小芽转接后仍有一定程度污染10d后开始萌发小芽,外植体褐化较为严重

10d后开始萌发小芽,萌发数少,外植体褐化严重,小芽转接后陆续污染

收稿日期:2004-01-20