Qiagen 公司焦磷酸测序PCR试剂盒PyroMarkPCR Kit中文说明书
Qiagen 公司焦磷酸测序PCR试剂盒 PyroMark® PCR Kit中文说明书
PyroMark PCR试剂盒（部件号978703和978705）。在室温下（15-25℃）可储存3天，如需保存时间较长，应储存在-20°C。
有关详细信息，请参阅PyroMark PCR技术手册，可以在www.1mpi.com找到手册。
提供技术援助，请拨打免费电话00800-22-44-6000，或在www.1mpi.com 找到区域的电话号码。
开始前的注意事项
■ 一个引物必须在其5' 添加端生物素®以便焦磷酸测序的模板制备。 ■ 我们建议用PyroMark Assay Design Software 2.0设计引物 ■ 如果要用Q-Solution，请执行不加Q-Solution的平行扩增。 ■ 我们建议添加CoralLoad®，这能集中最好的PCR性能。
1、 解冻所需的溶液（表1所列），每个彻底混合。根据表1建立反应。
PyroMark PCR Master Mix含有终浓度为1.5mmol的MgCl2，这在大多数情况下提供了令人满意的结果。如果需要较高的浓度Mg2 +，使用25 mM MgCl2。 2、 轻轻上下吹打反应混合物使彻底混合，分配相应的量到PCR管中。 3、 每个PCR管中加入模板DNA（≤500ng/反应），我们建议10ng的人类基
因组DNA或10-20ng重亚硫酸盐转化的DNA。 4、 根据表2的热循环编程。如果使用热循环仪没有热盖，用100μL矿物油
覆盖反应。 5、 将PCR管放进PCR
仪，并开始循环程序。
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