关于生物分子学的一些论文

第17卷第4期2008年4月　　Vol117　No14Apr.2008武警医学院学报

ActaAcademiaeMedicinaeCPAF

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综述

DNA甲基化与肿瘤的关系

DNAmethylationandtumor

俞　媛,陈立军,王　玮　综述,呼文亮　审校

(11河北医科大学,河北　石家庄050017;21武警医学院生化教研室,天津300162;31武警医学院训练部,天津300162)

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关键词:DNA甲基化;肿瘤;CpG岛

【文章编号】　100825041(2008)0420337204　【中图分类号】　Q751　【文献标识码】　B

　　肿瘤的形成受遗传学修饰和表观遗传修饰的影响,

DNA甲基化是真核细胞正常的修饰方式,是一种重要的表

域被称作G岛(G岛的分布不是随机的,

Cp5,观遗传修饰,其异常在肿瘤等多种疾病的发生重要的作用。DNA式,也是脊椎动物DNA。这种修饰反应通常发生在CpG,它与维持染色体的结构、胚胎发育、X染色体的失活、细胞记忆与衰老等有密切的关系。对DNA甲基化的研究可为临床上评估肿瘤风险、制定预防策略、早期诊断和跟踪肿瘤预后提供了有价值的指导。

1　DNA甲基化的机理和研究方法111　DNA甲基化的机理

DNA甲基化是真核细胞DNA最普通的修饰方式,被

60%以上包含在CpG岛内。CpG岛(inactivity)。

1.2　DNA甲基化的研究方法

目前常用于DNA甲基化研究的方法有甲基化特异性

PCR(methylation2specificPCR,MSPCR)、限制酶PCR

[2]

[1]

、

酶切法、Southern印迹、限制性界标基因组筛选法(Restric2

tionlandmarkgenomicscanning,RLGS)

等。其中,MSPCR

和Southern印迹因其操作简便,结果具有较强的特异性而成为DNA甲基化研究最常用的方法。限制酶PCR可用于混合基因片段中DNA甲基化的快速检测。简捷的酶切法和

RLGS不仅可以反映出DNA甲基化水平是否改变,以作定

量分析,还能通过酶的识别位点,反映出甲基化的部位。

除上述几种常用方法外,还有亚硫酸盐测序法(BGS)、变形高效液相色谱、PCR荧光变性曲线分析、Methylight等DNA甲基化分析的方法。

2　DNA甲基化与疾病

修饰位点的碱基可以是腺嘌呤的N26位,胞嘧啶的N24位,鸟嘌呤的N27位或是胞嘧啶的C25位,分别由不同的酶催化。通常所说的DNA甲基化多指是由DNA胞嘧啶C25甲基转移酶(DNA转移酶)识别5′2CG23′序列(CpG),把S腺苷甲硫酸(SAM)的甲基转移到胞嘧啶的5位,生成52甲基胞嘧啶(5mC)。

5mC存在于5′2CG23′二核苷酸回文结构中,即CpG

正常情况下,DNA甲基化的生物学功能主要表现为在

DNA序列不变的情况下,控制基因表达,维护染色体的完

整性和调节DNA重组及某些特定基因组区域的转录活性。但是,当DNA甲基化出现异常时即会引发疾病。近些年发现,许多疾病的发生发展都与DNA的甲基化密切相关,如:Chen等[3]研究患有精神分裂症和双重人格的患者时发现其大脑中RelnmRNA及其蛋白水平降低可高达50%,继续在体外用甲基化抑制剂处理Reelin基因(Reelin是一种细胞外蛋白,表达于脑的形成过程中和GABA能神经元全程)以观测该蛋白的表达情况与启动子甲基化的关系,他们认

岛。DNA是由A、T、C、G四种碱基组成,有16种可能的二核苷酸组合,常表示为NpN,N代表碱基,而p代表二者间的磷酸二酯键,因而CpG意味着C和G通过磷酸二酯键结合而成的二核苷酸组合。二核苷酸在人类基因组中只占10%,其中70%～80%为甲基化状态,小部分区域大约300～3000bp长度,CG出现率较高且较有价值,此区

【基金项目】天津市应用基础研究计划面上项目(06YFJMJC13100)【收稿日期】2007-10-19;【修回日期】2008-01-22

【作者简介】俞媛(1980-),女,籍贯河北,硕士在读,研究方向为生物化学与分子生物学。

为在精神患者中Reelin蛋白表达的下降与不相应的基因启动子区CpG岛甲基化有关;Lerer等[4]通过对1个四代之家的患病家族分析,发现ANKRD15基因(锚蛋白重复序列区域15,位于9P2413)3′端DMRT1

基因侧的CpG岛的甲基