实验一_苯酚的高效液相色谱法
实验一 高效液相色谱法-紫外法测定水中的苯酚含量
一、实验目的
1、熟悉高效液相色谱仪的结构
2、掌握苯酚的高效液相色谱-紫外测定法 3、熟练掌握高效液相色谱仪的操作 二、实验原理
苯酚是最简单的酚，为无色固体，有特殊气味，显酸性。苯酚是有机化工工业的基本原料，可通过多种途径对环境水体造成污染，对人类、鱼类以及农作物带来严重危害。根据国家环保部门有关规定，工作场所苯酚的最高允许质量浓度为5 ×10 - 6 μg/ L，饮用水中为2μg/ L，地面水中为0.1 mg/ L。苯酚的测量方法有多种，如溴化容量法、比色法、高效液相色谱法等。但前两种方法分析速度较慢、精度较低，高效液相色谱法是近年来发展起来的一种新技术，具有分析速度快、检测灵敏度高、操作简便、样品用量少等特点。 三、仪器和试剂 1、设备及试剂
安捷伦高效液相色谱仪1100，紫外检测器，C18色谱柱。 苯酚(分析纯) ，甲醇(色谱纯)，二次蒸馏水。 2、操作条件
色谱柱为C18柱；流动相为甲醇/ 二次蒸馏水= 80∶20 (体积比)；检测波长为270nm；流速为1.0 ml/ min；进样量为20μL。 四、实验步骤 1、标准曲线的制备
称取纯苯酚600 mg 于100.0 ml 容量瓶中，用适量甲醇溶解，用甲醇稀释至刻度。分别吸取该溶液(单位:ml) 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 于50 ml 的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。得到标准系列溶液。分别采用高效液相色谱-紫外法测定标准溶液，记录色谱峰面积，以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线。 2、样品分析
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